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大肠杆菌表达系统蛋白表达纯化

服务号:

ABF4000

目录价:

¥3500.00

服务周期:

2-3周

服务分类:

细菌系统蛋白表达纯化

大肠杆菌蛋白表达系统(Protein Expression in Bacteria)

大肠杆菌表达系统简介

1.      代谢途径和基因表达调控机制比较清楚

1)     全基因组测序,共有4405个开放性阅读框架;

2)     基因克隆表达系统成熟完善

3)     繁殖迅速,培养简单,操作方便,遗传稳定

2.      培养周期短

1)     大肠杆菌繁殖能力强,在营养条件充足时,20~30mins即可繁殖一代;

2)     大规模发酵成本低,具有巨大的生存潜力。

3.      目标基因表达水平高

表达水平较一般真核表达系统高,某些外源基因在大肠杆菌中的表达量可达总蛋白的5%~30%。

4.      遗传背景清楚

1)     对大肠杆菌的遗传背景和生理特性研究相当清楚,已有多种不同的抗药性、不同营养缺陷型和不同校正突变型的菌株供选择使用;

2)     可以根据不同的载体而选择不同的菌株。

5.      抗污染能力强,下游工艺简单,易于控制。

6.      已有大量可供选择利用的表达载体,被美国FDA批准为安全的基因工程受体菌。

df888经典版网页登录生物大肠杆菌表达系统优势

1.      df888经典版网页登录生物大肠杆菌可溶性表达成功率高达95%;

2.      df888经典版网页登录生物可以提供多种大肠杆菌表达载体,pET28b、pET22b、pGEX-6P-1等。

3.      多种大肠杆菌表达宿主,标准表达菌株BL21,可增强表达蛋白的菌株T7E,表达毒性蛋白的C41,增强蛋白可溶性表达的超低温菌株Arctic,以及其他经过df888经典版网页登录生物分子技术团队改造过的表达菌株,可以满足客户的不同需求。

4.      表达系统的优化。通过对表达系统进行优化,很大程度上解决蛋白不表达和包涵体的问题,如表达载体与表达菌株相容性测试、诱导表达条件的优化、复性等。

服务组合

服务项目(Service Items)

周期(周)Time(weeks)

蛋白分析与密码子优化

项目开始前完成

基因合成

2~4

载体构建

1

基因表达纯化测试

2

1L发酵表达及纯化

2

切标签

2

大规模的发酵与纯化

以项目需要为准

总计

8~10

注:

1)表达纯化测试一般包括2种载体,3种表达菌株,2个表达温度,12个条件的测试,根据客户的前期实验结果,有可能调整或缩短试验周期;

2)我们可提供的备选优化条件如下:

表达载体

pET28b\pET32a\pGEX-6p-1\pET22b\pBAD\pTrcHis等

表达菌株

Arctic\BL21(DE3)\Origami\Rosetta\T7 Expresss

表达温度

16℃\30℃\37℃


服务价格

4.1.1 大肠杆菌表达系统蛋白表达纯化ABF4000

 

服务项目名称

服务编号

 

大肠杆菌表达系统标准服务

 

ABF4000

 

步骤

服务内容

服务描述

价格(RMB

周期

1

密码子优化,基因合成

针对蛋白信息,技术人员进行结构预测分析,风险评估,方案制作;采用三密码子或多样三密码子规则,优化密码子序列,验证蛋白的序列氨基酸种类和比例,并进行基因合成,避免移码突变。

1.50/bp

2~3

2

亚克隆

利用PCR、胶回收、等技术手段将目的蛋白的基因导入适合载体中,构建稳定质粒

500

3~5

3

表达纯化测试(9~12种条件)

将质粒转染载体;并尝试并调整表达条件(包括温度、表达时长、表达体系、诱导剂浓度等条件);择最优条件进行100ml少量蛋白表达

1000

3~5

4

1L发酵纯化

以上述恰当条件以及客户对蛋白表达量的需求,发酵罐大量表达蛋白

2000

3~5

5

干冰运输样品

免费干冰运输

0

 

 

实验报告

可根据客户需求定制蛋白质量检测等额外服务;服务项目整体细节均可提供。

0

1

 

合计

 

3500(不含基因合成费用)

12~19

备注

如果客户提供质粒;可从表达纯测试开始做


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